包裝系統密封性，是指藥品包裝系統防止內容物損失、微生物侵入以及其他氣體進(jìn)入的能力。無(wú)菌產(chǎn)品的包裝系統是保障產(chǎn)品安全性和質(zhì)量的關(guān)鍵。用于檢查包裝系統密封性的方法包括微生物挑戰法（浸入或氣溶膠法）、高壓放電法、激光頂空分析法等。常用的密封性檢測方法見(jiàn)表1。

 表1常用的密封完整性檢查方法

法規背景

2025版中國藥典《9628無(wú)菌藥品包裝系統密封性指導原則標準草案公示稿（第二次）》以及2020年藥審中心發(fā)布的《化學(xué)藥品注射劑包裝系統密封性研究技術(shù)指南（試行）》和《化學(xué)藥品注射劑仿制藥質(zhì)量和療效一致性評價(jià)技術(shù)要求》中指出，對于無(wú)菌制劑，需要選擇適當且經(jīng)過(guò)驗證的密封性檢查方法對樣品進(jìn)行檢測。密封性檢查方法優(yōu)選能夠確定產(chǎn)品最大允許泄露限度的確定性方法。如果方法的靈敏度無(wú)法達到產(chǎn)品最大允許泄露限度水平，建議至少采用兩種方法進(jìn)行密封性驗證，其中一種推薦使用微生物挑戰法。

USP <1207.2> Package Integrity Leak Test Technologies（密封性泄露檢測技術(shù)）中也提到，“當沒(méi)有經(jīng)過(guò)驗證的理化泄露測試方法或當測試結果要求有防止微生物進(jìn)入的直接證據時(shí)，浸沒(méi)微生物挑戰法是最有效的。”

對于無(wú)菌制劑而言，在產(chǎn)品開(kāi)發(fā)階段，需結合藥品自身特點(diǎn)及生產(chǎn)設備綜合考慮，選擇合適的密封性檢測方法，并對兩種方法進(jìn)行驗證，進(jìn)而在日常商業(yè)化生產(chǎn)中，選擇靈敏度最高的方法對產(chǎn)品進(jìn)行抽樣檢測。然而，對于熔封產(chǎn)品（如玻璃或塑料安瓿），應進(jìn)行100%的密封性檢測。一般出于便利性和商業(yè)化成本的考慮，可以選擇微生物挑戰法對產(chǎn)品的密封性進(jìn)行研究。

微生物挑戰法介紹

微生物挑戰法是通過(guò)將裝有促生長(cháng)培養基的包裝浸沒(méi)于菌懸液中暴露（液體負荷挑戰測試）來(lái)評價(jià)包裝完整性。通過(guò)挑戰微生物后在包裝內容物中的生長(cháng)來(lái)證明泄漏，是一種概率性檢查方法。2023年版《藥品GMP指南 無(wú)菌制劑》中列舉了微生物侵入法驗證包裝密封性的實(shí)例，操作步驟如圖1所示。

圖1微生物侵入試驗法驗證密封性實(shí)例—《藥品GMP指南（第2版）無(wú)菌制劑》

自2024年2月1日起實(shí)施的團標TZJPA 002-2023《注射劑包裝密封性檢查 微生物挑戰：浸入式暴露試驗要求》首次提出了對注射劑包裝密封性檢查相關(guān)的微生物挑戰技術(shù)要求。該團標對微生物挑戰法進(jìn)行了細致的解讀，從試驗程序、挑戰容器、微生物選擇、培養基選擇和樣品準備、取樣、挑戰懸液制備以及暴露試驗條件等幾個(gè)參數進(jìn)行規定，并對微生物挑戰法方法靈敏度試驗進(jìn)行資料性展示。

微生物挑戰法存在的難點(diǎn)

微生物挑戰法的試驗條件宜采用實(shí)際運輸、使用及工藝中可能遇到的最不利條件，需考慮微生物種類(lèi)與濃度、真空/壓力條件、測試時(shí)間、結果確認、樣品除菌方法等多個(gè)參數。

需使用濃度較高的菌液，存在生物安全隱患

常用的挑戰微生物包括黏質(zhì)沙雷氏菌、缺陷短波單胞菌、萎縮芽孢桿菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌等。GMP指南和USP 1207要求最低濃度為105（cfu/ml）。然而，傳統微生物挑戰法是直接將菌懸液傾倒入測試罐中，傾倒過(guò)程中菌懸液飛濺會(huì )對人員安全產(chǎn)生威脅。

另外，GMP指南和團標TZJPA 002-2023指出，當挑戰試驗結束后，需擦干試樣容器外殘余的菌懸液（或用無(wú)菌水清洗樣品外壁），并將樣品放入保護容器或無(wú)菌袋中進(jìn)行培養。在擦拭、清洗、轉移過(guò)程中，菌懸液可能會(huì )逸出污染實(shí)驗環(huán)境或對人員安全造成威脅。

需模擬實(shí)際環(huán)境中可能出現的壓力變化

由于產(chǎn)品在運輸過(guò)程中可能出現壓力變化，例如在飛機高空運輸時(shí)，低壓環(huán)境導致包裝系統內氣壓高于環(huán)境氣壓，若出現泄露，微生物可能會(huì )侵入。另外，產(chǎn)品在滅菌過(guò)程中也可能出現壓力變化。因此，微生物挑戰法試驗過(guò)程中需模擬實(shí)際壓差條件，以達到最不利條件。

 具體絕對壓力條件與不同運輸海拔之間的關(guān)系 （ASTM D6653/D6653M 壓力換算表）

挑戰試驗過(guò)程中數據的可靠性

GMP指南中明確闡述了數據可靠性的整體策略，其中指出：通過(guò)數據和記錄追溯到產(chǎn)生數據、修改數據的個(gè)人或系統，確保數據和記錄中的簽名與實(shí)際操作人員一致；數據及記錄在整個(gè)生命周期內清晰可讀取、可追溯、可保存，在數據及記錄中清晰地呈現步驟或事件發(fā)生的順序。因此，在微生物挑戰試驗過(guò)程中，需保證數據和記錄的可靠性，以滿(mǎn)足GMP要求。

解決方案-泰林細菌侵入測試儀
BIT-L01

BIT-L01S

泰林生物研發(fā)的細菌侵入測試儀完美解決了微生物挑戰法中的難點(diǎn)。采用細菌侵入測試儀進(jìn)行微生物挑戰試驗，抽真空、加正壓、菌液加注以及排放、清洗、轉運培養、結果觀(guān)察以及滅菌均在全封閉條件下完成，可保護試驗人員并防止對實(shí)驗環(huán)境造成污染；可精準調壓，且壓力調節范圍完全滿(mǎn)足實(shí)際環(huán)境可能出現的壓力變化；試驗過(guò)程電子數據全程保留，可追溯，不可修改，支持三級權限、電子簽名，符合GMP要求。

此外，細菌侵入測試儀適用于安瓿瓶、西林瓶、輸液袋等多種類(lèi)型的包裝，可設置多種配方程序，滿(mǎn)足不同產(chǎn)品測試需要。

產(chǎn)品用途

總結

無(wú)菌藥品包裝容器的密封性能，對于保持藥品的無(wú)菌要求至關(guān)重要。微生物挑戰法可用于驗證包裝容器的密封性。細菌侵入測試儀是基于微生物挑戰法和色水法，專(zhuān)門(mén)用于無(wú)菌藥品包裝完整性的儀器，通過(guò)設置不同壓力變化的場(chǎng)景條件，驗證特定不同包裝容器及密封工藝對微生物的阻隔性能。